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本试剂盒适用于从各种酵母中提取核蛋白。提取过程简单方便。制备的核蛋白纯度高，保持天然活性，绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

• 使用方便，提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
  
• 将蛋白提取的时间缩短至1小时～2小时。
  
• 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
  
• 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
  
• 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性。

• 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
  
• 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
  
• 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
  
• 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

• 提取液制备：每200μL蛋白提取液D中分别加入2μL蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
  
• 酵母培养物，在4℃，5000rpm条件下离心5～10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集酵母沉淀。
  
• 用PBS洗涤酵母两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
  
• 每100μL体积酵母沉淀物中加入400μL酵母核蛋白提取液A，混匀后，30℃条件下保温15分钟。
  注：酵母数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。
  
• 5000rpm条件下离心5～10分钟，收集酵母沉淀。
  
• 用300μL酵母洗涤液洗涤酵母一次，离心收集菌体。
  
• 酵母沉淀物中加入500μL酵母蛋白提取液B，混匀后，在室温条件下轻微振荡45～60分钟。
  
• 5000rpm条件下离心5～10分钟，收集沉淀。
  
• 沉淀用300μL酵母洗涤液洗涤两次。离心收集沉淀。
  
• 沉淀中加入400μL冷的酵母核提取液C，高速涡旋15秒，振荡器振荡10分钟。
  
• 再次高速涡旋振荡5秒，然后在4℃，12000×g条件下离心5分钟，弃上清。
  
• 在沉淀中加入200μL冷的核蛋白提取液D，高速涡旋振荡15秒。
  
• 置振荡器上振荡30～40分钟。
  
• 在4℃，16000×g条件下离心10分钟。
  
• 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到酵母核蛋白。
  
• 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
  注：
  ● 建议用BCA法进行蛋白定量。
  ● 蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。